目的体外克隆并表达HPV58 E6,为研究HPV58 E6的致癌机理及制备预防性疫苗奠定基础.方法利用PCR反应及基因重组技术,从HPV58全基因组中扩增出HPV58 E6基因片段,并将其插入带有GST(谷胱甘肽巯基转移酶)标签的原核表达载体,IPTG诱导表达.结果基因测序分析、酶切电泳证实重组质粒pGEX-4T-3/HPV58 E6序列正确,并可在大肠杆菌中高效表达,进一步经Glutathione Sepharose 4B获得纯化的GST-HPV58E6融合蛋白.结论成功构建了人pGEX-4T-3/HPV58 E6原核表达载体,表达并纯化了GST-HPV58 E6蛋白,为其致癌作用的研究奠定了基础.
作者：陈晓黎；雷霆；杨军；周乐；王一理
来源：中国皮肤性病学杂志 2006 年 20卷 4期
