背景与目的:研究显示,丙酮酸代谢的改变在结直肠癌的发生发展中起重要作用,而结直肠癌干细胞中microRNA(miRNA)表达异常可能与丙酮酸代谢密切相关.笔者前期通过TCGA数据库分析发现,miR-520c-3p在结直肠癌中表达升高,且与预后相关.然而,miR-520c-3p是否参与了丙酮酸代谢尚不清楚.因此,本研究探讨结直肠癌干细胞中miR-520c-3p的表达与丙酮酸代谢的关系.
方法:选择人结肠癌细胞株,并从中分离纯化结直肠癌干细胞.检测过表达或敲低miR-520c-3p后,结直肠癌干细胞及结直肠癌细胞增殖能力、丙酮酸氧化水平、乳酸产量的变化.用D-[U-13C]葡萄糖孵育细胞,质量同位素分析追踪葡萄糖衍生碳的命运.通过miRNA序列分析和遗传学手段分析和鉴定miR-520c-3p的功能底物.
结果:过表达miR-520c-3p后,结直肠癌干细胞的增殖能力明显增强、丙酮酸氧化水平明显下降、乳酸产量明显升高(均P＜0.05);用D-(U-13C)葡萄糖培养后,未标记的柠檬酸盐(m+0)明显增加,而高阶柠檬酸盐标记(m+1、m+4和m+5)明显减少(均P＜0.05).在敲低miR-520c-3p后,结直肠癌干细胞的上述情况呈反向变化(均P＜0.05).过表达或敲低miR-520c-3p对结直肠癌细胞的上述指标均无明显影响(均PP＞0.05).miR-520c-3p可以靶向线粒体丙酮酸载体1(MPC1)mRNA 3'UTR(P＜0.05).过
作者：赵英旋；白玉勤；欧阳卫东
来源：中国普通外科杂志 2023 年 32卷 10期
