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目的构建TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的真核表达质粒,观察其对BALB/c裸鼠肝癌细胞皮下移植瘤模型的抑瘤作用.方法提取U937细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增出胞外区(114-281aa),连入溶菌酶信号肽序列,构建分泌型TRAIL重组质粒;建立裸鼠7402肝癌细胞皮下移植瘤模型,纯化后的质粒DNA与脂质体聚乙烯胺混合后经肌肉注射进行基因转染,体内验证重组蛋白的抑瘤活性,采用TUNEL法进行肿瘤组织细胞凋亡检测.结果肿瘤体积测定结果显示,TRAIL对肝癌细胞生长有抑制作用;凋亡检测光镜下可见有棕褐色凋亡细胞,细胞凋亡指数增高.结论重组TRAIL质粒能引起肿瘤细胞的凋亡,抑制7402肝癌细胞的生长.

作者:王正兵;贾筱琴;陈兵;李厚达

来源:中国普外基础与临床杂志 2005 年 12卷 3期

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作者:
王正兵;贾筱琴;陈兵;李厚达
来源:
中国普外基础与临床杂志 2005 年 12卷 3期
标签:
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肝癌 基因治疗
目的构建TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的真核表达质粒,观察其对BALB/c裸鼠肝癌细胞皮下移植瘤模型的抑瘤作用.方法提取U937细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增出胞外区(114-281aa),连入溶菌酶信号肽序列,构建分泌型TRAIL重组质粒;建立裸鼠7402肝癌细胞皮下移植瘤模型,纯化后的质粒DNA与脂质体聚乙烯胺混合后经肌肉注射进行基因转染,体内验证重组蛋白的抑瘤活性,采用TUNEL法进行肿瘤组织细胞凋亡检测.结果肿瘤体积测定结果显示,TRAIL对肝癌细胞生长有抑制作用;凋亡检测光镜下可见有棕褐色凋亡细胞,细胞凋亡指数增高.结论重组TRAIL质粒能引起肿瘤细胞的凋亡,抑制7402肝癌细胞的生长.