目的 探讨高糖诱导细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)过度激活在胰岛β细胞凋亡及胰岛素分泌调节中的作用机制.方法 体外培养Min6小鼠胰岛β细胞.采用不同浓度的葡萄糖(5 mmol/L组、20 mmol/L组和30 mmol/L组)刺激胰岛β细胞6 h,收取和固定细胞,行免疫印迹和免疫荧光法测定p35的表达;将p35基因克隆到腺病毒载体中,将p35病毒和空载体病毒(EV)分别转染到胰岛β细胞中(p35组和EV组),测定p35蛋白表达、CDK5活性及胰岛素分泌水平;采用CDK5抑制剂(p35+Ros组)进行抑制试验;采用细胞凋亡相关抗体Cleaved caspase 3测定胰岛β细胞凋亡.结果 20 mmol/L组和30 mmol/L组p35的表达较5 mmol/L组升高,30 mmol/L组p35的表达较20 mmol/L组升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).不同浓度葡萄糖培养的胰岛β细胞CDK5的表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).20 mmol/L组和30 mmol/L组胰岛β细胞CDK5活性较5 mmol/L组增高,30 mmol/L 组胰岛β细胞CDK5活性较20 mmol/L组增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).20 mmol/L组和30 mmol/L组在刺激6 h较2 h胰岛素分泌均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).p35组p35表达较EV组增高,p35组可见p25条带,p35组CDK5活性较EV组增高,p35组胰岛素分泌水平较EV组增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).EV组和p35+R

作者：郑亚莉；陆晓华；曹丽；王慧；李博；鄂静；保莉；罗红艳；兰晓梅

来源：中国全科医学 2013 年 16卷 24期