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目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、小凹蛋白-1(CAV1)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在同型半胱氨酸(Hcy)促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖中的作用.方法 2016年1—6月采用组织贴块法分离SDF级SD大鼠胸主动脉中膜并传代培养VSMCs,取4~7代细胞用于实验.细胞分为4组,分别为空白对照组、100μmol/L Hcy组、200μmol/L Hcy组、500μmol/L Hcy组,使用相应浓度Hcy(0、100、200、500μmol/L)进行干预培养,采用Transwell法检测VSMCs迁移能力、MTT法检测VSMCs增殖情况〔以光密度(OD)值表示〕,硝酸还原酶法测定VSMCs释放NO情况,Western blotting检测VSMCs eNOS、CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达情况.结果 VSMCs穿膜细胞数与Hcy浓度呈正相关(r=0.582,P=0.020).OD值与Hcy浓度呈正相关(r=0.620,P=0.015).100、200、500μmol/L Hcy组释放NO低于空白对照组(P<0.05).NO(r=-0.479,P=0.028),eNOS蛋白表达水平(r=-0.544,P=0.033)与Hcy浓度呈负相关.NO与eNOS蛋白表达水平呈正相关(r=0.721,P=0.009).100、200、500μmol/L Hcy组VSMCs CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05).CAV1蛋白表达水平(r=0.505,P=0.042),PI3K蛋白表达水平(r=0.428,P=0.030)、p-Akt蛋白表达水平(r=0.389,P=0.0

作者:纪昕;王鑫;岳晓乐;赵丹丹;郭玉楷;李永军

来源:中国全科医学 2017 年 20卷 12期

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作者:
纪昕;王鑫;岳晓乐;赵丹丹;郭玉楷;李永军
来源:
中国全科医学 2017 年 20卷 12期
标签:
半胱氨酸 肌细胞,平滑肌 一氧化氮合酶 小凹蛋白 磷脂酰肌醇3-激酶 Cysteine Myocytes smooth muscle Nitric oxide synthase Caveolae Phosphoinositide 3 - kinase
目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、小凹蛋白-1(CAV1)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在同型半胱氨酸(Hcy)促进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖中的作用.方法 2016年1—6月采用组织贴块法分离SDF级SD大鼠胸主动脉中膜并传代培养VSMCs,取4~7代细胞用于实验.细胞分为4组,分别为空白对照组、100μmol/L Hcy组、200μmol/L Hcy组、500μmol/L Hcy组,使用相应浓度Hcy(0、100、200、500μmol/L)进行干预培养,采用Transwell法检测VSMCs迁移能力、MTT法检测VSMCs增殖情况〔以光密度(OD)值表示〕,硝酸还原酶法测定VSMCs释放NO情况,Western blotting检测VSMCs eNOS、CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达情况.结果 VSMCs穿膜细胞数与Hcy浓度呈正相关(r=0.582,P=0.020).OD值与Hcy浓度呈正相关(r=0.620,P=0.015).100、200、500μmol/L Hcy组释放NO低于空白对照组(P<0.05).NO(r=-0.479,P=0.028),eNOS蛋白表达水平(r=-0.544,P=0.033)与Hcy浓度呈负相关.NO与eNOS蛋白表达水平呈正相关(r=0.721,P=0.009).100、200、500μmol/L Hcy组VSMCs CAV1、PI3K、p-Akt蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05).CAV1蛋白表达水平(r=0.505,P=0.042),PI3K蛋白表达水平(r=0.428,P=0.030)、p-Akt蛋白表达水平(r=0.389,P=0.0