目的构建副溶血弧菌不耐热性溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)tlh基因重组质粒.方法根据已知GenBank中的tlh基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从副溶血弧菌基因组DNA中扩增编码TLH的基因片段,克隆至pET32a+质粒,转化大肠杆菌DH5 感受态细胞,经酶切及PCR鉴定,而后进行测序.结果tlh基因体外扩增产物大小约1300bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,测序结果与已知序列基本吻合.结论在国内首次克隆了副溶血弧菌tlh基因,为研究TLH的功能和探讨TLH作为作为特异性诊断靶抗原的研究奠定了基础.
作者：李志峰；聂军
来源：中国人兽共患病杂志 2003 年 19卷 2期
