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目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA-175抗原的结合肽.方法以EBA-175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Western blot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA-175之间的结合特性.对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较.结果获得9株可与EBA-175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK).其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA-175的受体GPA的108-110位氨基酸同源.竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA-175与其单抗的结合.结论获得了可与EBA-175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA-175与GPA的结合起重要作用.

作者:郝文波;孙晓敏;王萍;陈白虹;徐伟文;李明

来源:中国人兽共患病学报 2006 年 22卷 6期

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作者:
郝文波;孙晓敏;王萍;陈白虹;徐伟文;李明
来源:
中国人兽共患病学报 2006 年 22卷 6期
标签:
恶性疟原虫 红细胞结合抗原175 血型糖蛋白A 噬菌体随机肽库
目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA-175抗原的结合肽.方法以EBA-175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Western blot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA-175之间的结合特性.对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较.结果获得9株可与EBA-175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK).其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA-175的受体GPA的108-110位氨基酸同源.竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA-175与其单抗的结合.结论获得了可与EBA-175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA-175与GPA的结合起重要作用.