目的 建立一种鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重PCR快速检测方法.方法 根据已发表的结核分枝杆菌23S rRNA 和牛分枝杆菌特殊基因序列, 设计并合成了两对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,测定其特异性和敏感性,并对238份牛临床样品的DNA分别进行了检测.结果 该方法对牛分枝杆菌能扩增出838bp和631bp 的特异性基因片段,结核分枝杆菌只扩增出838 bp基因片段而扩增不出631bp 的特异性基因片段,对参试的其它牛菌株的DNA 扩增结果均为阴性.敏感度检测可达到50 pg的DNA含量.临床样品检测结核分枝杆菌阳性有21份,牛分枝杆菌阳性有1份,其它临床样品扩增结果全部为阴性.结论 本方法可作为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具.
作者：谢芝勋；谢志勤；雷剑明；刘加波；庞耀珊；邓显文；谢丽基；温娟
来源：中国人兽共患病学报 2008 年 24卷 12期
