目的 构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白21(Culture filtrate protein 21,CFP21)原核表达载体,获得CFP21蛋白.方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,PCR扩增cfp21基因.质粒PET28a(+)为表达载体,构建PET28a(+)/cfp21质粒,转化入大肠埃希菌DH5a中,抽提质粒,PCR扩增,测序,转化到大肠埃希菌BL21中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,并用His Bind蛋白纯化试剂金纯化CFP21.结果 构建、表达和纯化了CFP21,分子量约为24kD,主要以包涵体形式存在.结论 目的 基因克隆入宿主菌中并表达成功,纯化得到CFP21蛋白,为CFP21的进一步研究奠定基础.
作者:谢富佳;谭继英;梁正羽;乔梅;祝秉东;吴玉敏;杨燕;章国平
来源:中国人兽共患病学报 2011 年 27卷 2期