目的 确定不同梅毒螺旋体TpN47基因序列的差异性及其跨膜结构,建立基于TpN47基因检测梅毒螺旋体的荧光定量PCR方法.方法 通过使用NCBI/Blast,Pfam,TMHMM Server v.2.0等网络资源分析梅毒螺旋体TpN47基因编码蛋白的保守功能结构域和跨膜区域.根据参考序列设计引物,采用PCR技术从梅毒螺旋体基因组DNA中扩增TpN47基因,将其连接入克隆载体pMDl8-T进行测序,并用DNASTAR软件比较不同梅毒螺旋体菌株TpN47基因的核苷酸序列.根据梅毒螺旋体TpN47基因保守区域设计引物,建立基干该目的 基因的荧光定量分析PCR检测方法并分析其灵敏度、特异性和稳定性.同时,采用基于TpN47基因的荧光定量PCR对梅毒螺旋体感染患者血液样本进行检测.结果 研究表明,梅毒螺旋体TpN47基因为梅毒螺旋体外膜蛋白编码基因,其产物定位干外膜表面.不同梅毒螺旋体菌株中TpN47基因的核苷酸序列保守,相似度达99
作者：王莹；丁肖青；朱胜；楼宏强
来源：中国人兽共患病学报 2012 年 28卷 2期
