目的 探讨重组家蝇天蚕素-人溶菌酶( Mdc-hly)在大肠杆菌中的表达条件及纯化.方法 利用SDSPAGE电泳和BandScan凝胶电泳图像分析系统研究诱导温度、诱导时机、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度和诱导时间对融合蛋白表达的影响.融合蛋白经His琼脂糖柱素和色谱纯化后,Western blot鉴定.结果 在起始菌浓度为A600 =0.6时加入浓度为1.0 mmol/L的IPTG,37℃诱导6h,融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的39.1%.纯化后融合蛋白纯度可达95%,Western blot鉴定为目的蛋白.结论 确定了重组融合蛋白的最佳表达条件,并纯化了目的蛋白.
作者:卢雪梅;金小宝;朱家勇
来源:中国生化药物杂志 2012 年 33卷 4期