您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览203 | 下载41

目的:探讨慢病毒介导的CXCR 7-shRNA转染人胃癌细胞株SGC 7901后重楼总皂苷干预对CXCR7蛋白表达的影响。方法设计并合成CXCR7的3条shRNA序列及1条阴性对照序列,与pSilencerTM 4.1系统合成构建重组慢病毒载体,转染HEK 293 T细胞包装病毒并检测滴度;将3种重组慢病毒载体及阴性对照分别感染人胃癌细胞SGC 7901,RT-PCR检测用药前后CXCR 7 mRNA的表达情况,测定沉默效率,筛选沉默效率最高的一组CXCR 7-shRNA作为后续实验表达载体;MTT法检测转染CXCR 7-shRNA对SGC 7901细胞的增殖的影响以及重楼总皂苷干预后的影响;Western blot检测转染CXCR 7-shRNA后SGC 7901细胞蛋白表达情况以及重楼总皂苷干预的影响。结果测序证实3种慢病毒载体及1组阴性对照载体均包装成功,滴度分别4.9×108 pfu/mL、3.6×108 pfu/mL、5.2×108 pfu/mL和2.0×108 pfu/mL;3组慢病毒载体转染SGC 7901细胞后,CXCR 7 mRNA的表达量均较阴性对照组显著降低(P<0.05),其中CXCR 7-shRNA-1组和重楼总皂苷组对CXCR7的抑制率显著高于其他2组(P<0.05);CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后,肿瘤细胞的生长增殖显著下降,与其他组相比有显著性差异(P<0.05);CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后,与空病毒载体组、空白组相比,CXCR 7蛋白表达

作者:赵东文;李谌;王海龙;陆航

来源:中国生化药物杂志 2014 年 2期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:203 | 下载:41
作者:
赵东文;李谌;王海龙;陆航
来源:
中国生化药物杂志 2014 年 2期
标签:
胃癌 CXCR 7 CXCL 12 慢病毒载体 shRNA gastric cancer CXCR 7 CXCL 12 lentivirus vector shRNA
目的:探讨慢病毒介导的CXCR 7-shRNA转染人胃癌细胞株SGC 7901后重楼总皂苷干预对CXCR7蛋白表达的影响。方法设计并合成CXCR7的3条shRNA序列及1条阴性对照序列,与pSilencerTM 4.1系统合成构建重组慢病毒载体,转染HEK 293 T细胞包装病毒并检测滴度;将3种重组慢病毒载体及阴性对照分别感染人胃癌细胞SGC 7901,RT-PCR检测用药前后CXCR 7 mRNA的表达情况,测定沉默效率,筛选沉默效率最高的一组CXCR 7-shRNA作为后续实验表达载体;MTT法检测转染CXCR 7-shRNA对SGC 7901细胞的增殖的影响以及重楼总皂苷干预后的影响;Western blot检测转染CXCR 7-shRNA后SGC 7901细胞蛋白表达情况以及重楼总皂苷干预的影响。结果测序证实3种慢病毒载体及1组阴性对照载体均包装成功,滴度分别4.9×108 pfu/mL、3.6×108 pfu/mL、5.2×108 pfu/mL和2.0×108 pfu/mL;3组慢病毒载体转染SGC 7901细胞后,CXCR 7 mRNA的表达量均较阴性对照组显著降低(P<0.05),其中CXCR 7-shRNA-1组和重楼总皂苷组对CXCR7的抑制率显著高于其他2组(P<0.05);CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后,肿瘤细胞的生长增殖显著下降,与其他组相比有显著性差异(P<0.05);CXCR 7-shRNA-1转染SGC 7901后,与空病毒载体组、空白组相比,CXCR 7蛋白表达