目的:探讨心肌细胞缺氧复氧(H/R)时是否存在异常的ROS/JNK/Egr-1信号通路。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为以下组别:对照( control)组、control+ROS激活剂黄嘌呤氧化酶/次黄嘌呤( con+XO/HX)组、H/R组、H/R+ROS清除剂依达拉奉( EDA)组、H/R+ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸( NAC)组、H/R+JNK抑制剂SP600125组。建立心肌细胞H/R模型,采用不同浓度的EDA(2×10-6、2×10-5、2×10-4 M)、NAC(5×10-4、2×10-3 M、8×10-3 M)、XO/HX(1mU/mL/1.2×10-4 M ,3mU/mL/3.6×10-4 M,5mU/mL/6.0×10-4 M)、SP600125(2×10-5 M)处理细胞。流式细胞仪法检测 H9c2心肌细胞内 ROS 水平。Western blot方法检测心肌细胞Egr-1、p-JNK、JNK蛋白表达的变化。结果 H/R组ROS水平及Egr-1蛋白表达均显著高于control组( P<0.05);2种中、高浓度的ROS清除剂EDA和NAC均能明显降低H/R所致的ROS的高水平和Egr-1蛋白的高表达(均P<0.05)。而2种低剂量的ROS清除剂对H/R所致的Egr-1蛋白表达以及ROS水平的影响差异无统计学意义。 ROS水平与Egr-1蛋白表达呈高度正相关( r=0.91,P<0.01)。 XO/HX各浓度组JNK激活程度显著高于对照组,且随着XO/HX浓度
作者:郝思远;廖晗;李振鹏;李伟秋;徐涵;张艳美
来源:中国生化药物杂志 2015 年 7期