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目的:研究苦参素(OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞氧化应激和细胞凋亡的影响。方法无菌环境下分离 SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20μg/mL、40μg/mL和80μg/mL)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/mL)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过MTT法检测细胞存活率;检测细胞培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]释放量;测定细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过 RT PCR检测细胞中bcl 2mRNA、BaxmRNA表达并计算bcl 2/Bax比值,通过Western blot方法检测细胞caspase 3蛋白表达水平并进行半定量分析。结果与模型对照组比较,OMT40μg/mL、80μg/mL干预组、SXN干预组乳鼠心肌细胞存活率显著升高,培养液中 AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中 SOD、CAT活性显著升高且 MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中 bcl 2 mRNA 表达显著上调且 Bax mRNA 表达显著下调、bcl 2/Bax 表达比值显著升高,细胞中caspase 3蛋白表达显著升高,上述差异均有统计学意义(P<0.

作者:陈树杰;杨晓龙;王雪芬;陈晨;王朝宗

来源:中西医结合心脑血管病杂志 2016 年 14卷 20期

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作者:
陈树杰;杨晓龙;王雪芬;陈晨;王朝宗
来源:
中西医结合心脑血管病杂志 2016 年 14卷 20期
标签:
缺氧/复氧损伤 心肌细胞 苦参素 氧化应激 细胞凋亡 hypoxia reoxygenation injury cardiomyocytes oxymatrine oxidative stress apoptosis
目的:研究苦参素(OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞氧化应激和细胞凋亡的影响。方法无菌环境下分离 SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20μg/mL、40μg/mL和80μg/mL)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/mL)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过MTT法检测细胞存活率;检测细胞培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]释放量;测定细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过 RT PCR检测细胞中bcl 2mRNA、BaxmRNA表达并计算bcl 2/Bax比值,通过Western blot方法检测细胞caspase 3蛋白表达水平并进行半定量分析。结果与模型对照组比较,OMT40μg/mL、80μg/mL干预组、SXN干预组乳鼠心肌细胞存活率显著升高,培养液中 AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中 SOD、CAT活性显著升高且 MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中 bcl 2 mRNA 表达显著上调且 Bax mRNA 表达显著下调、bcl 2/Bax 表达比值显著升高,细胞中caspase 3蛋白表达显著升高,上述差异均有统计学意义(P<0.