目的 探讨细胞内高表达谷胱甘肽过氧化物酶(GPX1)能否提高阿尔茨海默病(AD)细胞模型中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的磷酸化水平.方法 采用MTT法确定G418的筛选浓度,采用目的质粒与绿色荧光蛋白质粒共转染的方式将GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒转染至PC12细胞,以G418筛选浓度筛选出成功转染进GPX1重组质粒和pLNCX空载体质粒的细胞;采用MTT法确定β淀粉样蛋白(Aβ25-35)的最佳诱导浓度,建立AD细胞模型;以最佳Aβ25-35浓度分别诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组细胞48 h,采用免疫细胞化学方法检测诱导前后各组细胞内P-CREB的水平.结果 在最佳Aβ25-35浓度诱导转染GPX1重组质粒组和转染pLNCX空载体质粒组前,两组细胞内的P-CREB水平无统计学差异(P>0.05);诱导48 h后,两组细胞内P-CREB水平均显著降低(P<0.01),但转染GPX1重组质粒组细胞内的P-CREB水平仍明显高于转染pLNCX空载体质粒组的水平(P<0.01).结论 Aβ25-35可导致细胞内P-CREB 水平降低,转染GPX1重组质粒可在一定程度上逆转Aβ25-35所致的P-CREB水平降低.
作者:张葳蕤;刘丽君;高茂龙
来源:中国神经免疫学和神经病学杂志 2012 年 19卷 5期