目的 探讨自身反应性CD8+中心记忆性T细胞(TCM)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的致病作用.方法 用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55肽段/完全弗氏佐剂(CFA)乳化液于雌性C57BL/6(B6)小鼠背部4点皮下注射,在0 h(CFA乳化液注射当时)及48 h时间点分别予以百日咳毒素(PTX)腹腔注射,建立EAE模型.于发病高峰期后处死EAE小鼠获取脾脏和淋巴结的单个核细胞(MNC),利用免疫磁珠法经阴性选择纯化CD8+T细胞;进一步采用流式细胞术分选TCM(CD8+ CCR7+ CD44high).将EAE鼠CD8+T细胞、健康鼠CD8+T细胞分别过继转移(经鼠尾静脉注射)至雌性Rag-1-/-小鼠体内(2×106/只,n=6),进行Kono评分及病理学检查,以确证CD8+T细胞的致病性;进一步对EAE鼠CD8+T细胞不同亚群进行致病性研究,分为CD8+ TCM常规剂量组(5×105/只,n=6)、CD8+终末效应记忆性T细胞(Ter TEM,5×105/只,n=6)组、磷酸缓冲盐溶液(PBS,n=6)组及CD8+ TCM高剂量组(1.5×106/只,n=3),分别将不同剂量CD8+ TCM、Ter TEM以及PBS相应细胞/溶液注射于Rag-1/小鼠;予以MOG35-55/CFA和PTX诱导,进行神经功能评分;于过继转移后第40 d处死小鼠,检测其病理学改变.结果 将EAE鼠CD8+T细胞过继转移至Rag-1-/-小鼠体内,在27 d～29 d后出现双后肢瘫痪症状,病理学显示脑/脊髓内炎性细胞

作者：杨亭亭；姜红；向雅娟；何洋；刘喷飓；殷贺；高旭光；刘广志

来源：中国神经免疫学和神经病学杂志 2021 年 28卷 2期