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可溶性血管内皮细胞生长因子受体(Flt-1)具有受体拮抗剂作用,可竞争结合血管内皮细胞生长因子,(VEGF)并与其膜表面受体Flt-1及KDR形成异源二聚体,最终阻断VEGF的生物学活性.利用RT-PCR技术从人脐静脉内皮细胞扩增出Flt-1胞外Ⅰ~Ⅳ区cDNA片段,通过基因重组将该片段克隆于谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体PGEX2-T中,连接产物转化大肠杆菌XL1-blue,经IPTG诱导可获大量稳定表达的Flt-1-GST融合蛋白.该表达产物经变性复性处理后,可特异性结合125Ⅰ-VEGF.大量具有活性的可溶性Flt-1的获得有助于新的抗肿瘤血管形成方法的探索.

作者:安平;董志伟;寿成超

来源:中国生物化学与分子生物学报 2000 年 16卷 1期

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作者:
安平;董志伟;寿成超
来源:
中国生物化学与分子生物学报 2000 年 16卷 1期
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血管内皮细胞生长因子 可溶性受体 Flt-1 原核表达 结合活性
可溶性血管内皮细胞生长因子受体(Flt-1)具有受体拮抗剂作用,可竞争结合血管内皮细胞生长因子,(VEGF)并与其膜表面受体Flt-1及KDR形成异源二聚体,最终阻断VEGF的生物学活性.利用RT-PCR技术从人脐静脉内皮细胞扩增出Flt-1胞外Ⅰ~Ⅳ区cDNA片段,通过基因重组将该片段克隆于谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体PGEX2-T中,连接产物转化大肠杆菌XL1-blue,经IPTG诱导可获大量稳定表达的Flt-1-GST融合蛋白.该表达产物经变性复性处理后,可特异性结合125Ⅰ-VEGF.大量具有活性的可溶性Flt-1的获得有助于新的抗肿瘤血管形成方法的探索.