重组人内毒素结合肽(endotoxin binding peptide,EBP)融合蛋白在大肠杆菌中表达,分离和纯化后对其进行生物学活性观察.将构建好的Pinpoint Xa3-EBP生物素融合表达栽体转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达菌株,亲和层析法纯化表达产物,因子Xa(factor Xa)切割分离内毒素结合肽,采用凝胶过滤和反相液相高效色谱法两步纯化,从相对分子质量、N端10个氨基酸的序列分析等方面进行鉴定;利用人单核细胞U937对重组内毒素结合肽进行了生物学活性的检测.结果发现,内毒素结合肽以包涵体形式存在,因子Xa酶切融合蛋白后得到3.5kD的内毒素结合肽,纯化后内毒素结合肽纯度达99
作者：麻莉；刘友生；王晓东；李永旺
来源：中国生物化学与分子生物学报 2004 年 20卷 4期
