为获得MUC1/Y全长cDNA及其胞外段蛋白,以用于进一步的生物学功能及肿瘤生物学治疗的研究.利用RT-PCR从HeLa细胞中扩增MUC1/Y全长cDNA;PCR扩增其胞外段,克隆到原核表达载体pGEX-2T,转化DH5a菌,诱导表达;亲和层析纯化;凝血酶酶切、GST活性及N端蛋白测序鉴定;免疫家兔制备多克隆抗体.所得MUC1/Y cDNA的开放读框为759 bp,登录于GenBank(AF125525).其信号肽编码序列缺失9 bp,第331位发生G-A转换,造成缬氨酸突变为蛋氨酸.表达获得约40 kD融合蛋白GST-Yex,占菌体总蛋白25
作者：张立新；李春海；孙丽亚
来源：中国生物化学与分子生物学报 2001 年 17卷 5期
