采用RT-PCR方法扩增出426 bp 着色性干皮病A(xeroderma pigmentosum group A, XPA)cDNA片段(2~427 bp),反向插入pcDNA3.1质粒构建XPA反义RNA表达载体.经测序证实,该片段序列与XPA mRNA对应片段完全互补.通过脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒转染肺癌A549细胞,RT-PCR检测表明转染XPA反义RNA重组质粒能够抑制肺癌细胞XPA mRNA表达;MTT实验表明转染XPA反义RNA的肺癌细胞对顺铂敏感性增强.本研究为深入探讨NER途径基因功能及临床克服肿瘤耐药提出了一个新的思路.
作者:吴晓明;范玮;蒋易;周李承;郝巧玲;周宜开
来源:中国生物化学与分子生物学报 2003 年 19卷 2期