利用间接免疫荧光、基因转染、抗体剔除(Ab-knock-out)、细胞平板集落形成、流式细胞术以及半胱氨酸天冬酰胺酶(caspase3)活性检测等方法,从survivin核移位、Rb磷酸化、细胞周期演进、细胞克隆形成和细胞凋亡等方面,探讨EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)调控细胞增殖和细胞凋亡双重效应的分子机制.结果发现,LMP1表达介导survivin核移位,促进细胞Rb磷酸化增加,S期细胞数显著增加;LMP1通过survivin促进细胞克隆形成.用Ab-knock-out阻断survivin核移位和survivin反义核酸抑制survivin表达时,Rb磷酸化水平降低,S期细胞减少,抑制LMP1介导的细胞增殖,活化细胞caspase 3,诱导细胞凋亡.结果提示,EB病毒LMP1通过survivin促进细胞增殖和抑制细胞凋亡.
作者:唐发清;顾焕华;胡智;唐敏;翁新宪;易薇;曹亚
来源:中国生物化学与分子生物学报 2003 年 19卷 5期