应用纤维蛋白单克隆抗体IF-53,观察当纤维蛋白的"A"位点与另一纤维蛋白D区域的"a"位点结合后纤维蛋白E区的变化.纤维蛋白原Aα链经赖氨酰肽链内切酶消化后,应用反相HPLC分离纯化;通过ELISA法检测单克隆抗体IF-53与纤维蛋白原及其衍生物的反应情况;应用放射免疫法检测RGD合成肽抑制纤维蛋白单体与IF-53反应的情况.发现IF-53能与纤维蛋白原Aα链的一个片段反应,该片段经氨基酸序列分析显示为纤维蛋白原Aα链氨基末端(1～29).该抗体能与酸溶解的纤维蛋白单体和可溶性纤维蛋白及XDP反应,但不能与酸化纤维蛋白原或GPRP反应,因此IF-53的抗原决定簇在Aα 20～29,与凝血酶作用于纤维蛋白肽A,暴露出的聚合位点"A"(Aα17～19)紧邻.当GPRP存在于纤维蛋白原溶液时,经凝血酶作用产生这种纤维蛋白单体不能与IF-53反应.Aα(93～99)(ILRGDFS)合成肽部分抑制纤维蛋白单体与IF-53的反应.实验结果提示,当纤维蛋白单体相互聚合,或纤维蛋白单体与纤维蛋白原聚合时,纤维蛋白单体结构会发生变化,其中Act20～29片段成为新抗原暴露于E区表面,并且Aα20～29与纤维蛋白原细胞粘附区域RGD1片段邻近.
作者：杨威；吴斌；孙冬梅
来源：中国生物化学与分子生物学报 2004 年 20卷 2期
