目的构建弓形虫信号转导蛋白14-3-3基因的重组质粒,并在E.coli中高效表达,用于免疫学诊断.方法以限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGEM-T/Toxo-14-3-3,获得弓形虫信号转导蛋白14-3-3编码基因片段,插入载体pET28a,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,在非变性条件下纯化融合的表达产物,通过Westernblot和ELISA检测其特异的免疫反应性.结果所构建的弓形虫信号转导蛋白14-3-3(rToxo-14-3-3)在原核系统中的重组表达质粒,以6个His融合蛋白的形式得到高效表达,其表达量占细菌裂解液中总蛋白量的49.2
作者：都建；沈继龙；王维；李小月；胡元生；钟政荣；刘淼
来源：中国生物制品学杂志 2005 年 18卷 1期
