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目的检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上MC1R蛋白及其cDNA,为研究黑色素瘤细胞表面受体及靶向配体奠定基础.方法利用放射配体分析法检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上的MC1R蛋白;用RT-PCR方法扩增人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R的cDNA,并克隆至pMD-18T质粒,进行酶切分析鉴定及扩增片段DNA序列测定.结果放射配体分析结果表明,125I-αMSH可与人恶性黑色素瘤A375细胞膜特异结合.RT-PCR结果显示,扩增产物的大小与MC1R的cDNA相符.测序结果证实扩增片段为MC1R基因的特异片段.结论证实人恶性黑色素瘤A375细胞膜上表达MC1R蛋白.MC1R基因的成功克隆为其进一步研究提供了必要条件.

作者:李铁征;李泽鸿;李月红;邱业峰;张培因;王树君;朱平

来源:中国生物制品学杂志 2005 年 18卷 3期

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作者:
李铁征;李泽鸿;李月红;邱业峰;张培因;王树君;朱平
来源:
中国生物制品学杂志 2005 年 18卷 3期
标签:
恶性黑色素瘤细胞A375 MC1R 125I-αMSH 放射配体分析 RT-PCR
目的检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上MC1R蛋白及其cDNA,为研究黑色素瘤细胞表面受体及靶向配体奠定基础.方法利用放射配体分析法检测人恶性黑色素瘤A375细胞膜上的MC1R蛋白;用RT-PCR方法扩增人恶性黑色素瘤A375细胞MC1R的cDNA,并克隆至pMD-18T质粒,进行酶切分析鉴定及扩增片段DNA序列测定.结果放射配体分析结果表明,125I-αMSH可与人恶性黑色素瘤A375细胞膜特异结合.RT-PCR结果显示,扩增产物的大小与MC1R的cDNA相符.测序结果证实扩增片段为MC1R基因的特异片段.结论证实人恶性黑色素瘤A375细胞膜上表达MC1R蛋白.MC1R基因的成功克隆为其进一步研究提供了必要条件.