目的 构建Kozak序列引导的人p53(khp53)基因重组智能腺病毒载体rAdMH-khp53,并检测p53基因的表达.方法 将带有Kozak序列的p53基因克隆到重组腺病毒穿梭载体中,再利用AdMaxTMHi-IQ系统,获得重组腺病毒,检测病毒滴度,并进一步感染Saos-2细胞,利用RT-PCR及Western blot检测p53基因的表达.结果 khp53基因成功克隆到腺病毒载体中,重组腺病毒滴度为1.63×108 IU/ml,RT-PCR方法检测到p53基因的转录产物,Western blot检测到p53基因在Saos-2细胞中的高水平表达.结论 已成功构建了带有Kozak序列的重组腺病毒载体rAdMH-khp53,并高效表达人p53基因.
作者:谢庆军;范凌云;李季风;胡晓燕
来源:中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 2期