目的:探讨 KOZAK 序列对细胞周期调节蛋白 1 (CCNL1)基因在人乳腺癌细胞MDA-MB-231 中表达的影响.方法:构建 pcDNA3.1-CCNL1 和 pcDNA3.1-CCNL1-K (含有 KOZAK 序列)的真核重组表达质粒,采用 Fugene HD 转染试剂将重组表达质粒转染入 MDA-MB-231 细胞,并用荧光定量 PCR 和 Western blot 方法检测 pcDNA3.1-CCNL1 和 pcDNA3.1-CCNL1-K 重组质粒在 MDA-MB-231 细胞中表达的差异.结果:在 MDA-MB-231 细胞中质粒 pcDNA3.1- CCNL1-K 比空白对照细胞 mRNA 和蛋白质表达量要高;而质粒 pcDNA3.1- CCNL1 比空白对照细胞 mRNA 和蛋白质表达量也高.结论:在 MDA-MB-231 细胞中,质粒 pcDNA3.1- CCNL1-K 较 pcDNA3.1- CCNL1 的 mRNA 和蛋白表达水平均存在差异,KOZAK 序列能够提高 CCNL1 基因在 MDA-MB-231 细胞中的表达.
作者:李鹏;马艳娇;徐晓芳;宫鹏涛;杨举;李建华;李赫;欧阳红生;张西臣
来源:现代肿瘤医学 2011 年 19卷 7期