目的 构建口蹄疫病毒(FMDV)多价DNA疫苗,并检测其免疫原性.方法 以复合多表位表达盒OAAT及Asia Ⅰ型FMDV的P1-2A-3C基因为基础,构建FMDV多价DNA疫苗pIRES-OAAT-PI-2A-3C,并用间接免疫荧光(IFA)方法 检测目的 蛋白在HeLa细胞中的表达.进一步进行小鼠免疫试验,并应用ELISA法检测小鼠血清抗体,ELISPOT检测小鼠脾淋巴单细胞IFN-γ的分泌水平.流式细胞术检测脾T淋巴细胞亚群数量,淋巴细胞转化试验检测特异性淋巴细胞增殖水平.结果 所构建的FMDV多价DNA疫苗在HeLa细胞中获得了正确表达.免疫小鼠后,血清特异性抗体水平、脾淋巴单细胞IFN-γ的分泌、脾T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的数量及特异性淋巴细胞增殖水平均显著提高.结论已成功构建了FMDV多价DNA疫苗,并诱导小鼠产生了特异性的细胞免疫和体液免疫应答.
作者:常巧呈;霍晓伟;李太元;金宁一;鲁会军;郑敏;谷长维;牟伟锋;胡博;于长勇;马鸣潇;丛艳昭
来源:中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 10期