目的 建立表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株.方法 采用PCR方法分别扩增HBsAg及rhIFNα2b基因,以GS linker连接后,克隆入表达质粒pBI121,构建植物细胞表达质粒pBISI,转化农杆菌LBA4404,感染人参愈伤组织细胞.经G418筛选抗性细胞株.提取细胞基因组DNA,进行PCR检测;应用ELISA法检测HBsAg及rhIFNα2b的表达;通过Western blot分析表达蛋白的反应原性.结果 重组表达质粒pBISI经酶切鉴定,表明构建正确.筛选得到3株正常生长的人参细胞株,基因组DNA扩增得到约1200 bp的融合基因片段;经ELISA检测,其中1株能够表达HBsAg及rhIFNα2b;表达的蛋白与鼠抗HBsAg血清在相对分子质量35 000处出现特异条带.结论 已获得了表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株.
作者：于海鹏；刘丹；薛雁；任琦；李娟；富锐丽；李铮；姚为民；盛军
来源：中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 1期
