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目的 构建含人骨形态蛋白-2(BMP-2)基因的重组腺病毒,并转染入间充质干细胞,诱导其向骨细胞分化,从而生成新骨并修复骨缺损.方法 用重组腺病毒作为载体,将人BMP-2基因转染入小鼠胚胎问充质干细胞,Western blot检测BMP-2虽白的分泌表达.观察重组腺病毒Adv-BMP-2转染后小鼠间允质干细胞的增殖变化,并进行碱性磷酸酶活性、钙化结节形成和细胞中成骨相关蛋白mRNA转录水平等细胞分化的指征检定.将Adv-BMP-2转染后的小鼠问充质干细胞注入裸鼠右侧大腿四头肌内,观察新骨生成情况.将重组腺病毒Adv-BMP-2转染的大鼠骨髓间充质干细胞崩于大鼠大节段骨缺损的修复,并对植入的骨髓间充质干细胞进行跟踪观察.结果 Western blot分析表明,重组腺病毒Adv-BMP-2转染的细胞可分泌表达BMP-2蛋白.转染后的小鼠间充质干细胞的增殖速度与重组腺病毒Adv-BMP-2的转染量旱剂量相关.Adv-BMP-2转染的干细胞碱性磷酸酶上升,并在体外形成钙结节,同时,成骨相关蛋白Osteopontin、Osteocalcin、Bone sialoprotein及Collagen仅1(I)的mRNA水平也上升.用Adv-BMP-2转染的问充质干细胞能在裸鼠的大腿肌肉内形成发育成熟的新骨,转染的白体性骨髓间充质干细胞能有效修复大鼠大节段股骨缺损.在免疫抑制剂FK506的支持下,Adv-BMP-2转染的同种异体骨髓

作者:楼觉人;弘之土田;桥木淳一

来源:中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 4期

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作者:
楼觉人;弘之土田;桥木淳一
来源:
中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 4期
标签:
间充质干细胞 基因治疗 新骨生成 大节段骨缺损 修复
目的 构建含人骨形态蛋白-2(BMP-2)基因的重组腺病毒,并转染入间充质干细胞,诱导其向骨细胞分化,从而生成新骨并修复骨缺损.方法 用重组腺病毒作为载体,将人BMP-2基因转染入小鼠胚胎问充质干细胞,Western blot检测BMP-2虽白的分泌表达.观察重组腺病毒Adv-BMP-2转染后小鼠间允质干细胞的增殖变化,并进行碱性磷酸酶活性、钙化结节形成和细胞中成骨相关蛋白mRNA转录水平等细胞分化的指征检定.将Adv-BMP-2转染后的小鼠问充质干细胞注入裸鼠右侧大腿四头肌内,观察新骨生成情况.将重组腺病毒Adv-BMP-2转染的大鼠骨髓间充质干细胞崩于大鼠大节段骨缺损的修复,并对植入的骨髓间充质干细胞进行跟踪观察.结果 Western blot分析表明,重组腺病毒Adv-BMP-2转染的细胞可分泌表达BMP-2蛋白.转染后的小鼠间充质干细胞的增殖速度与重组腺病毒Adv-BMP-2的转染量旱剂量相关.Adv-BMP-2转染的干细胞碱性磷酸酶上升,并在体外形成钙结节,同时,成骨相关蛋白Osteopontin、Osteocalcin、Bone sialoprotein及Collagen仅1(I)的mRNA水平也上升.用Adv-BMP-2转染的问充质干细胞能在裸鼠的大腿肌肉内形成发育成熟的新骨,转染的白体性骨髓间充质干细胞能有效修复大鼠大节段股骨缺损.在免疫抑制剂FK506的支持下,Adv-BMP-2转染的同种异体骨髓