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目的 制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体.方法 用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合.捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体.间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤细胞染色体和单抗识别位点分析.将杂交瘤细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后.检测细胞培养上清的效价.结果 3株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgG1型,腹水单抗效价均高于10~(-6),杂交瘤细胞染色体数介于94~98条之间,均识别sTRAIL分子上线性表位.细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后的上清效价保持稳定.结论 已成功制备了3株町稳定分泌抗sTRAIL单克隆抗体的杂交瘤细胞,为TRAIL的定性定量检测及组织表达分析奠定了基础.

作者:潘勇兵;田生和;李国喜;全家妩

来源:中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 12期

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作者:
潘勇兵;田生和;李国喜;全家妩
来源:
中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 12期
标签:
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 胞外区 单克隆抗体 捕获ELISA TNF-relaLed apoptosis-induced ligand(TRAIL) Extracellular domain Monoclonal Antibody Capture ELISA
目的 制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体.方法 用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合.捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体.间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤细胞染色体和单抗识别位点分析.将杂交瘤细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后.检测细胞培养上清的效价.结果 3株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgG1型,腹水单抗效价均高于10~(-6),杂交瘤细胞染色体数介于94~98条之间,均识别sTRAIL分子上线性表位.细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后的上清效价保持稳定.结论 已成功制备了3株町稳定分泌抗sTRAIL单克隆抗体的杂交瘤细胞,为TRAIL的定性定量检测及组织表达分析奠定了基础.