目的 克隆猪血清白蛋白(PSA)基因,并在毕赤酵母中分泌表达.方法 Trizol法提取新鲜猪肝组织总RNA,经RT-PCR扩增PSA全长cDNA,克隆至酵母分泌型表达载体pPICZaC,构建重组表达质粒pPICZaC-PSA,电转化至毕赤酵母X33,甲醇诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 重组表达质粒pPICZaC-PSA经双酶切及测序鉴定正确,表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约69 500处可见特异条带,表达量为菌体总蛋白的29.5
作者:朱艳平;王玉;徐慧;郭霄峰
来源:中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 2期