目的 克隆弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,为弓形虫基因操作提供工具.方法 应用PCR方法 扩增弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的5'非编码区、致密颗粒蛋白GRA2的3'编码区和红色荧光蛋白(RFP)基因,并构建重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA,经电穿孔法将其转染弓形虫速殖子,倒置荧光显微镜观察RFP的表达.结果 重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA经双酶切和测序证明构建正确,质粒转染弓形虫速殖子24 h,荧光显微镜下可观察到红色荧光,表明克隆的SAG1启动子具有转录活性.结论 已成功克隆了弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,并能介导外源基因在弓形虫体内的表达.
作者：安娜；张瑞岩；赵志远；商立民；刘全；魏峰
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 6期
