目的从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增出其主要表面抗原1(SAG1)全长的基因编码序列,构建重组原核表达载体并在大肠埃希菌中进行表达,为进一步研制弓形虫病免疫诊断试剂盒打下基础.方法根据弓形虫RH株主要表面抗原SAG1的cDNA序列设计一对引物,利用聚合酶链反应(PCR)技术从RH株弓形虫基因组中扩增出SAG1的全长基因,将其克隆到载体pGEX-4T-3中,并通过基因测序加以证实;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-32c中,在大肠埃希菌中经IPTG 诱导表达.结果从刚地弓形虫RH株基因组中成功扩增到1 030 bp的全长SAG1基因,该基因在原核系统中经诱导表达出一分子量约37 000大小的融合蛋白,表达产物以包涵体的形式存在.结论 SAG1是弓形虫主要的表面抗原,原核表达的SAG1融合蛋白在弓形虫病的免疫诊断中具有明显的潜在应用价值.
作者：汤俊明；谈永飞；司进；印鑫；徐明；梁幼生；朱荫昌
来源：中华检验医学杂志 2003 年 26卷 12期
