目的 纯化B型肉毒神经毒素,并比较未激活和用胰蛋白酶激活的B型肉毒神经毒素的分子特性,分析在酸性和碱性条件下B型肉毒毒素复合物的完整性.方法 取未激活、胰蛋白酶激活和热处理激活的B型肉毒毒素复合物,采用阴离子交换柱层析纯化神经毒素(分别为A、B和C组).在酸性条件下溶解激活的B型肉毒毒素复合物(D组).对各组进行纯度(特异毒性)测定和SDS-PAGE分析.结果 柱层析后,神经毒素纯度均比复合物的纯度高,激活的神经毒素比未激活的高2~3倍;在非还原和还原条件下,A组的SDS-PAGE显示神经毒素、重链和轻链3条带;B组显示重链和轻链2条带;C组在非还原条件下显示重链和轻链2条带,在还原条件下只显示轻链1条带.在酸性条件下.B型肉毒毒素复合物由神经毒素与非毒性成分构成,在碱性条件下,神经毒索与非毒性成分分离.结论 已成功纯化了B型肉毒神经毒素,经胰蛋白酶处理后,单链裂解为双链,比活性提高.
作者:张雪平;李小娟;何星
来源:中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 7期