建立快速诊断及定型神经毒素对肉毒中毒的治疗、降低死亡率具有十分重要的意义。用一对A型肉毒梭菌特异的寡核苷酸引物,扩增A型肉毒神经毒素基因轻链区域一段472bp的DNA片段,对梭状芽胞杆菌属的10种68株菌进行了鉴定,并对PCR检测A型肉毒神经毒素基因的灵敏度进行了检查。结果表明,所有20株A型肉毒梭菌PCR扩增均为阳性,其余各型肉毒梭菌及其它各种梭菌均为阴性。扩增产物经限制性内切酶分析与预期的酶切片段一致。用溴化乙锭对扩增产物染色,可从3×10
3个细菌中检测出A型肉毒神经毒素基因。用酚-氯仿抽提A型肉毒梭菌全菌体DNA进行PCR扩增,可从10pg的DNA中得到清晰的扩增产物。由此可见,该PCR扩增系统用于A型肉毒神经毒素基因的检测具有灵敏度高,特异性强等特点,为A型肉毒梭菌的鉴定及肉毒中毒的快速诊断提供了一种新的手段。
作者:王兴民;孟筱琦;王成怀
来源:中华微生物学和免疫学杂志 1997 年 17卷 3期