目的 探讨pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)分离含His-Tag标签的人胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的影响,并确定最佳洗脱条件.方法 在0.50 mol/L盐浓度条件下,分别取pH 6.0、7.0、7.8和9.0 4种缓冲液进行咪唑梯度洗脱;在合适的pH值条件下,分别取氯化钠浓度0.25、0.50和0.75 mol/L 3种缓冲液进行咪唑梯度洗脱.分析在不同pH值及盐浓度条件下洗脱融合蛋白所需要的咪唑浓度及回收率.结果 在所考察的pH值范围内,洗脱融合蛋白所需的咪唑浓度随洗脱液pH值的升高而逐渐降低,当洗脱液pH值为7.8时,融合蛋白的分离效果最佳,大部分杂蛋白被0～40 mmol/L咪唑洗脱液去除且不含融合蛋白,而绝大部分融合蛋白在咪唑浓度达80～200 mmol/L时被洗出,总叫收率达(83.7±1.0)
作者：蒋加庆；蔡海波；胡爽；谭文松
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 9期
