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目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法.方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较.结果 NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%~3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2% ~ 107%之间;化学法定量结果RSD在0.6% ~7.9%之间,相对误差在3%~6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5% ~ 105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320 ~ 410 mg/g之间.结论 1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量.

作者:普元倩;朱文勇;寸怡娜;代小虎;张新文;钟汉斌;宋绍辉;吴亚楠;赵娜娜

来源:中国生物制品学杂志 2014 年 27卷 8期

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作者:
普元倩;朱文勇;寸怡娜;代小虎;张新文;钟汉斌;宋绍辉;吴亚楠;赵娜娜
来源:
中国生物制品学杂志 2014 年 27卷 8期
标签:
核磁共振波谱法 b型流感嗜血杆菌多糖 含量测定 Nuclear magnetic resonance (NMR) Haemophilus influenzae type b (Hib) polysaccharides Content determination
目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法.方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较.结果 NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%~3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2% ~ 107%之间;化学法定量结果RSD在0.6% ~7.9%之间,相对误差在3%~6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5% ~ 105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320 ~ 410 mg/g之间.结论 1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量.