目的 探讨人参皂苷代谢产物CK对卵巢癌细胞CAOV3的增殖抑制作用,及其诱导细胞凋亡的机制.方法 采用MTT比色法测定不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0、50.0μg/ml)CK对卵巢癌细胞CAOV3增殖的抑制作用.流式细胞术检测不同浓度(0、2.5、5.0 μg/ml)CK诱导CAOV3细胞凋亡的情况;4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色观察细胞凋亡过程中形态变化;体外Caspase活力测定凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的激活情况;Western blot分析Caspase-3底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的断裂情况.结果 CK可明显抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖,CK浓度与其对细胞的增殖抑制作用呈剂量-效应关系,IC50值为3.6μg/ml.随着CK浓度的增加,发生凋亡的细胞数增加,出现典型的凋亡形态特征的细胞逐渐增多.Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9均被激活.随着CK浓度的增加,酶活性增加,Caspase-3底物PARP断裂的条带逐渐加深.结论 CK对卵巢癌细胞CAOV3有毒性作用,能够抑制细胞增殖,且CK浓度与这种抑制作用呈剂量-效应关系;CK抑制CAOV3细胞的增殖作用是通过促进细胞凋亡来实现的,且这种细胞凋亡涉及内源及外源型途径.
作者:高岩;林英嘉;李杨;金英花
来源:中国生物制品学杂志 2015 年 28卷 2期