目的 用填料为羟基磷灰石的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体.方法 经protein A为填料的层析柱纯化抗TNF-α单克隆抗体后,通过DoE实验设计,对填料为羟基磷灰石的层析柱的洗脱流速、pH值及盐浓度进行优化,确定最佳洗脱条件后,进行抗TNF-α单克隆抗体的纯化,纯化产物经HPLC及毛细管电泳法检测其浓度、多聚体含量及纯度.结果 抗TNF-α单克隆抗体经protein A层析纯化后,回收率达96.1％,纯度为96.0％,多聚体含量下降至1.9％.通过DoE优化,筛选出最佳条件范围为:流速1～3 ml/min,0.25～0.30 mol/L NaCl,pH7.0～7.3,选定1 ml/min流速、0.25 mol/L NaC1、pH7.0、作为洗脱条件进行纯化,回收率为93.1％,纯度为97.3％,多聚体含量为0,优于参比制剂.结论 将羟基磷灰石用于抗TNF-α单克隆抗体的中度纯化,获得符合参比制剂质量的产品.
作者：杨辉；马旭通；孙文正；杨彬；王雅秋；林小鹊
来源：中国生物制品学杂志 2015 年 28卷 12期
