目的 制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果.方法 采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取IgG,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果.结果 硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的IgG;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与IgG按1:10的质量比混合,47℃反应4h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51％,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与IgG、正常血清同等的中和效果.结论 成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果.
作者：岳磊；朱凡丽；李华；杨婷；谢天宏；龙润乡；杨蓉；罗芳宇；谢忠平
来源：中国生物制品学杂志 2016 年 29卷 4期
