目的 建立检测狂犬病病毒PM株病毒滴度的改良蚀斑法,并验证其精密度.方法 于细胞接种病毒后第6天,分别加入不同浓度(0、50、75、100、200、400 mmol/L)HEPES溶液,以及分别于细胞接种病毒后第2、4、6、8天,加入最适浓度的HEPES溶液,确定HEPES最适加入浓度及蚀斑最适判定时间,建立改良的蚀斑法,检测48批狂犬病病毒毒力,并与小鼠脑内滴定法进行相关性比较;重复检测3次10批狂犬病病毒收获液毒力,计算变异系数(CV).结果 接种病毒后第6天后加入200 mmol/L HEPES溶液,形成的蚀斑清晰,易于计数.建立的蚀斑法与小鼠脑内滴定法具有高度相关性,3次检测结果的CV在0.4%~3.38%之间,重复性良好.结论 加入HEPES溶液改良后的蚀斑法,操作便捷,是较为理想的滴定狂犬病病毒PM株毒力的方法,可替代小鼠脑内滴定法.
作者:孙艳;陈智;钟静;刘莉娜;何敏;范凤鸣;杨欢;曾献武;刘杰
来源:中国生物制品学杂志 2019 年 32卷 5期