目的 比较胰蛋白酶(胰酶)和TrypLE消化Vero细胞的效果,确定细胞工厂培养Vero细胞的最佳消化工艺.方法 10层细胞工厂中Vero细胞生长成致密单层后,分别用(37±1)℃预热的0.25％胰酶和TrypLE及室温(18～26℃)的TrypLE进行消化,吸取消化后的细胞悬液进行细胞计数,并检测细胞活率.将消化后的细胞悬液接种至生物反应器中继续培养,检测葡萄糖代谢情况,并进行室温TrypLE消化细胞的重复性验证.结果 用(37±1)℃0.25％胰酶、TrypLE和室温TrypLE消化细胞所获得的平均细胞密度分别为1.70×106、1.68×106、1.65×106个/mL,细胞活率均在95％以上.与0.25％胰酶相比,使用TrypLE消化的细胞再培养时葡萄糖消耗量较高.10层工厂细胞消化所获细胞数的变异系数(CV)为2.47％,消化传代后Vero细胞培养阶段葡萄糖代谢量的CV均小于10％.结论 TrypLE作用温和,消化时细胞损伤较小,重复性好,细胞工厂规模化培养Vero细胞过程中可利用TrypLE替代胰酶进行细胞传代.
作者：张颖；张乐；赵兰英；马轩；邓立强；姜男；代慧慧；张晋；梁宏阳
来源：中国生物制品学杂志 2019 年 32卷 12期
