目的 研究胆固醇(cholesterol,CHOL)在非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acid,NEFA)介导的犊牛肝细胞脂质沉积中的作用,揭示CHOL对能量负平衡奶牛肝脂代谢的调控机制.方法 体外分离培养犊牛肝细胞,添加NEFA培养12 h,模拟能量负平衡状态下的高NEFA环境构建脂肪沉积模型,依据细胞生化指标的变化特征确定添加CHOL的最适浓度及时间.在细胞更换培养基后的不同时间点添加NEFA和CHOL,将细胞分为空白组、游离脂肪酸组、胆固醇组和酸+醇组,应用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometer,GC/MS)检测,获得组间的差异代谢物,再进行生物信息学分析.结果 空白组与胆固醇组相比,有包括丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、蛋氨酸在内的28个差异代谢物,其中有15个下调,13个上调;游离脂肪酸组和酸+醇组相比,共有包括苏氨酸、腺嘌呤、瓜氨酸在内的17个差异代谢物,其中水杨酸胆甾烷-3,5,6-三醇下调,其余16个上调,这些差异代谢物主要参与糖异生与类固醇合成的代谢通路.结论 CHOL通过上调丙氨酸、缬氨酸和苏氨酸来激活糖异生途径,缓解能量负平衡时脂质代谢所产生的沉积,还通过上调羊毛甾醇来激活类固醇途径,加强细胞吸收血浆中CHOL的能力.
作者：张翠羽；杨威；赵阳；郑家三；陈媛媛；罗春海；范钊；王建发；张洪友
来源：中国生物制品学杂志 2020 年 33卷 1期
