目的 优化辛德比斯病毒(Sindbis virus)和伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的培养和制备方法,建立高效价病毒制备方法.方法 从选用不同宿主细胞、不同的宿主细胞培养方式、以及不同的病毒悬液收集方式3方面考察病毒效价.病毒效价测定采用细胞病变法,按Karber氏法计算病毒效价.结果 用非洲绿猴肾(Vero)细胞培养的Sindbis病毒效价(8.63±0.45)明显高于用幼仓鼠肾(BHK)细胞培养的病毒效价(7.63±0.30)(P<0.05);用Vero细胞培养的PRV效价(8.13±0.59)也明显高于用BHK细胞培养的病毒效价(6.94±0.71)(P<0.05);宿主细胞长满单层后继续换液培养或再传代培养2种提高病毒效价的方式所制备的病毒效价(7.69±0.98 vs 7.54±0.69)的差异无统计学意义(P>0.05),可任选其一;收获病毒时,直接收集培养悬液离心组(直收-冻组)病毒效价(8.66±0.83)较先冻融2次再离心组(冻-收-冻组)病毒效价(8.14±0.91)高(P<0.05).结论建立了制备高效价Sindbis 病毒和PRV的方法;制备Sindbis病毒和PRV宜选用Vero 细胞;病毒培养悬液直接离心分装即可,既简化操作又可获高效价病毒.
作者:王卓妍;任芙蓉;周锡鹏;许金波;吕秋霜;龚晓燕
来源:中国输血杂志 2008 年 21卷 11期