目的 建立一种自主研发的针对细菌16 S rDNA基因的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法并评价该方法对浓缩血小板制品中细菌污染检测的效果.方法 设计16S rDNA基因保守区引物,构建SYBR Green Real-timePCR反应体系;然后分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和绿脓杆菌以初始浓度为1CFU/mL、10 CFU/mL和100 CFU/mL接种到浓缩血小板中,经22℃保存7d后,用实时定量荧光PCR方法进行细菌检测.结果 细菌污染后的血小板在常规保存条件下,最长保存期＜7d,不同接种浓度的细菌生长情况的变化趋势基本一致,所有种类的细菌均在d1、2表现出迅猛的增殖高峰,d3以后增殖趋于平缓.结论 该Real-time PCR检测体系可定量地检测出血小板的细菌污染的情况,可适用于血小板输注前的快速细菌污染检测.
作者：边国慧；杨春晖；高瞻；徐敏；何苗
来源：中国输血杂志 2015 年 28卷 4期
