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目的 了解干扰素刺激基因15(ISG15)对严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)复制的影响.方法 1) ISG15基因克隆:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,从Hela细胞中扩增获得ISG15基因,然后连接质粒形成ISG15表达载体.2)研究ISG15表达对SFTSV复制的影响:将ISG15质粒转染Hela细胞并过表达后,接种SFTSV,随后用荧光定量RT-PCR的方法观察ISG15对SFTSV复制的影响.结果 成功构建ISG15表达质粒,并在Hela细胞内过表达;SFTSV成功在Hela细胞内增殖,同时过表达ISG15可以抑制SFTSV的复制.结论 初步证明在Hela细胞中,过表达ISG15可以抑制SFTSV的复制,但具体机制还有待进一步探讨.

作者:陈旭;李世林;曾沛斌;陈利民

来源:中国输血杂志 2017 年 30卷 3期

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作者:
陈旭;李世林;曾沛斌;陈利民
来源:
中国输血杂志 2017 年 30卷 3期
标签:
干扰性刺激基因15 血小板减少综合征 严重发热 病毒复制 基因克隆 PCR,实时荧光定量 ISG15 SFTS severe fever virus replication gene clone PCR real-time fluorescence quantification
目的 了解干扰素刺激基因15(ISG15)对严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)复制的影响.方法 1) ISG15基因克隆:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,从Hela细胞中扩增获得ISG15基因,然后连接质粒形成ISG15表达载体.2)研究ISG15表达对SFTSV复制的影响:将ISG15质粒转染Hela细胞并过表达后,接种SFTSV,随后用荧光定量RT-PCR的方法观察ISG15对SFTSV复制的影响.结果 成功构建ISG15表达质粒,并在Hela细胞内过表达;SFTSV成功在Hela细胞内增殖,同时过表达ISG15可以抑制SFTSV的复制.结论 初步证明在Hela细胞中,过表达ISG15可以抑制SFTSV的复制,但具体机制还有待进一步探讨.