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目的 探讨雷帕霉素(RAPA)诱导过继性输注的耐受性树突状细胞(DCs)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的治疗效果.方法 分离15只BALB/C雄性小鼠(MHC为H-2Kd)的骨髓细胞及脾细胞,输注入经8.5Gy辐射处理(TBI照射)的30只雄性C57BL/6J小鼠(MHC为H-2Kb)中建立aGVHD模型(BALB/C→C57BL/6J);为验证aGVHD造模是否成功,将C57BL/6J小鼠分为MHC不合移植组、MHC相合移植组及单纯TBI照射组(10只/组),3组小鼠经8.5 Gy TBI照射后分别输入BALB/C来源骨髓细胞及脾细胞、C57BL/6J来源骨髓细胞及脾细胞及同等体积PBS对照,采用流式细胞术检测供鼠植入比例并观察受鼠存活情况.体外培养受鼠骨髓来源DCs,加入RAPA以诱导耐受性DCs(RAPA-tDCs),加入PBS作为对照DCs(PBS-DCs).将aGVHD模型鼠随机分为3组(10只/组),分别是RAPA-tDCs实验组(静脉输注RAPA-tDCs 4 ×106/只)、PBS-DCs对照组(静脉输注PBS-DCs 4 ×106/只)及PBS对照组(静脉输注PBS);采用活体荧光成像观察DCs在aGVHD小鼠体内的迁移、分布情况;同时监测3组小鼠的平均体重波动并统计生存率,评价RAPA-tDCs对小鼠aGVHD的抑制效果.结果 流式细胞术检测:与PBS-DCs组小鼠比较,RAPA-tDCs组小鼠DCs表面的CD40、CD80、CD86和MHCII表达丰度明显受到抑制(P<0.05);2组小鼠DCs表面趋化因子受体CCR1

作者:何楚琳;周欠欠;张玉龙;赵嫚;马聪;王政军;詹林盛;王小慧

来源:中国输血杂志 2018 年 31卷 3期

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何楚琳;周欠欠;张玉龙;赵嫚;马聪;王政军;詹林盛;王小慧
来源:
中国输血杂志 2018 年 31卷 3期
标签:
急性移植物抗宿主病 雷帕霉素 树突状细胞 归巢 动物aGVHD模型 小鼠
目的 探讨雷帕霉素(RAPA)诱导过继性输注的耐受性树突状细胞(DCs)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的治疗效果.方法 分离15只BALB/C雄性小鼠(MHC为H-2Kd)的骨髓细胞及脾细胞,输注入经8.5Gy辐射处理(TBI照射)的30只雄性C57BL/6J小鼠(MHC为H-2Kb)中建立aGVHD模型(BALB/C→C57BL/6J);为验证aGVHD造模是否成功,将C57BL/6J小鼠分为MHC不合移植组、MHC相合移植组及单纯TBI照射组(10只/组),3组小鼠经8.5 Gy TBI照射后分别输入BALB/C来源骨髓细胞及脾细胞、C57BL/6J来源骨髓细胞及脾细胞及同等体积PBS对照,采用流式细胞术检测供鼠植入比例并观察受鼠存活情况.体外培养受鼠骨髓来源DCs,加入RAPA以诱导耐受性DCs(RAPA-tDCs),加入PBS作为对照DCs(PBS-DCs).将aGVHD模型鼠随机分为3组(10只/组),分别是RAPA-tDCs实验组(静脉输注RAPA-tDCs 4 ×106/只)、PBS-DCs对照组(静脉输注PBS-DCs 4 ×106/只)及PBS对照组(静脉输注PBS);采用活体荧光成像观察DCs在aGVHD小鼠体内的迁移、分布情况;同时监测3组小鼠的平均体重波动并统计生存率,评价RAPA-tDCs对小鼠aGVHD的抑制效果.结果 流式细胞术检测:与PBS-DCs组小鼠比较,RAPA-tDCs组小鼠DCs表面的CD40、CD80、CD86和MHCII表达丰度明显受到抑制(P<0.05);2组小鼠DCs表面趋化因子受体CCR1