目的 建立基于一步法实时荧光定量PCR技术的寨卡病毒检测方法.方法 通过分析寨卡病毒全基因组核酸序列, 根据其NS5基因片段, 设计特异性引物, 构建重组质粒, 经体外转录后获得寨卡病毒RNA, 即阳性标准品, 建立标准曲线, 利用RT-PCR方法对检测体系做灵敏性、重复性试验, 以寨卡病毒GZ01毒株与Huh7.5.1细胞RNA混合或加入寨卡病毒的血浆标本对本方法测试.结果 建立的标准曲线线性关系良好, 灵敏度较高, 检测下限可达0.1 PFU/mL, 标准曲线方程:Y=-3.353X+36.345, 相关系数 (CV) 可达0.999.该方法特异性较好, 对登革病毒和丙肝病毒核酸检测无交叉反应, 可检出寨卡病毒感染的细胞样品和血浆样品中的寨卡病毒.结论 成功建立了1种基于实时荧光定量PCR的寨卡病毒核酸检测的高灵敏性方法.
作者：赵航；李玉佳；李世林；徐敏；陈利民
来源：中国输血杂志 2019 年 32卷 2期
