目的观察小鼠胚胎干细胞在六种培养体系中的生长情况. 方法小鼠胚胎干细胞(ES D3细胞株)在以下六种培养体系中培养:1. 原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)有血清培养,2. MEF无血清培养,3. SNL细胞有血清培养,4. LIF(白血病抑制因子)有血清无饲养层培养,5. LIF无血清无饲养层培养 , 6. 大鼠肝细胞(BRL)条件培养基培养.经体外培养10代后,观察其克隆形态,同时进行碱性磷酸酶检测并将ES细胞接种于裸小鼠皮下,观察ES D3的未分化状态和多潜能性. 结果六种培养体系培养的ES D3具有典型的ES细胞克隆形态:巢状(集落状)隆起生长,边缘清楚,表面平滑,结构致密;AKP强阳性;裸小鼠体内形成了由多种组织构成的畸胎瘤. 结论六种培养体系均能支持ES D3生长,并能保持其未分化性和多潜能性,为ES细胞的应用研究奠定了良好的基础.
作者:黄冰;黄文革;钟女奇;陈颖青;陈系古
来源:中国实验动物学报 2000 年 8卷 1期