目的 建立血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)显性负性突变体G143H转基因小鼠模型.方法 通过Sall/DraI酶切pCAGGHO-1G143H转基因表达载体,纯化回收HO-1G143H表达盒片段;通过显微注射把表达目的基因的DNA片段导入FVB小鼠受精卵原核,并移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠;用PCR对子代鼠尾DNA进行鉴定,并用Southem blot对结果做进一步验证;通过RT-PCR、免疫组化和Western blot方法检测HO-1基因的表达.结果 表达盒回收片段正确;假孕鼠出生的17只子代小鼠共有3只阳性,均为雄性;RTPCR、免疫组化和Western blot结果表明,阳性小鼠体内的HO-1 mRNA与蛋白表达水平增高.结论 成功建立HO-1显性负性突变体G143H表达的转基因小鼠,该模型为研究HO-1在体内的作用机制奠定了基础.
作者：王波；程萱；刘庆军；魏旭冉；尹玉静；高旭；杨晓；周虹
来源：中国实验动物学报 2010 年 18卷 3期
